- 分组：CD普食+WD高脂饮食，运动或久坐，年轻鼠（14w）和较老鼠（49-52w），野生或ApoE敲除，两两组合，一共16组
- 观察小鼠体重：ApoE敲除鼠受饮食和运动影响体重变化不明显，野生鼠比较明显
- 看斑块面积，对比，得出结论：运动对减少早期斑块有作用，晚期无作用。方法是使用苏丹Ⅳ染色，然后使用ImageJ测量
- 比较各组小鼠胆固醇和甘油三酯：老年运动ApoE-/-小鼠的脂质并未减少，可能与代谢和胰岛素有关？？与文章后续GSEA相联系。方法：酶标法测定脂质
- 测量运动后TREGs的变化。方法：使用 eBioscience™ 小鼠调节性 T 细胞染色试剂盒 #2 染色，之后流式细胞分析
- 测量细胞因子：方法：luminex系统，qPCR
- 芯片，观察饮食影响，找差异基因，富集分析
- 芯片中发现↑Ppargc1a，编码PGC-1α（之前报道过依赖运动的骨骼肌改变），之后针对斑块减少组，进行qPCR
- 芯片数据中几个HSP基因有改变 于是看HSP60和HSP90 （这俩和AS相关）mRNA表达量，有差异，并且有文献报道PGC-1α有关联，但是结果不太一致。后又评估了血浆中抗HSP60抗体滴度。这个HSP60对于AS是有害的，运动使HSP60减少。
- 讨论 ：高脂饮食的ApoE敲除鼠，相对于普通饮食，体重不会像WT鼠那样引起明显增加，这可能是由于缺乏对脂肪生成活性的诱导？Pereira SS, Teixeira LG, Aguilar EC, MatosoRO, Soares FL, Ferreira AV, Alvarez-Leite JI:Differences in adipose tissue inflammationand oxidative status in C57BL/6 and ApoE–/–mice fed high fat diet. Anim Sci J 2012; 83:549–555. Chiba T, Nakazawa T, Yui K, Kaneko E, ShimokadoK: VLDL induces adipocyte differentiationin ApoE-dependent manner. ArteriosclerThromb Vasc Biol 2003; 23: 1423–1429. 运动可以减少年轻鼠斑块，对老年斑块作用不大，老年斑块没有减少和胰岛素信号通路的基因下调有关。运动对 ApoE-/- 或 WT 小鼠的胆固醇或甘油三酯没有影响，并且有类似相同报道。老年TERGs在运动后反而减少，可能因为WD饮食造成的全身慢性低度炎症有关。此外，运动小鼠的骨骼肌TGF-β1 mRNA表达降低，表明其并非源自肌肉？ Our hypothesis is in linewith the findings reported by two other groups. In fact,Stein et al. [42] showed that young ApoE–/–PGC1α–/–mice are protected from atherosclerosis. By contrast,Xiong et al. [43] reported that old ApoE–/–PGC1α–/– miceare more prone to atherosclerosis development. These reportswould fit with our findings, where we showed a decreasein PGC1α1 mRNA in the running ApoE–/– mice, although not significant.举了两个相反的例子，本文章结果向其中一个。后边讨论了一下运动对AS的病变的好处，还有ApoE敲除小鼠可能会出现类似人阿尔茨海默症等。
Jakic B, Carlsson M, Buszko M, et al. The Effects of Endurance Exercise and Diet on Atherosclerosis in Young and Aged ApoE-/- and Wild-Type Mice. Gerontology. 2019;65(1):45-56. doi:10.1159/000492571
